NFV 45 008 : 2009

1 Domaine d'application
2 Références normatives
3 Termes et définitions
4 Principe
5 Milieux de culture et réactifs
   5.1 Diluant Peptone-Sel
   5.2 Solution de trypsine
   5.3 Solution de Tween 80
   5.4 Gélose Listeria selon Ottaviani et Agosti
   5.5 Milieux d'identification de Listeria monocytogenes
6 Appareillage et verrerie
   6.1 Mélangeur de type péristaltique (stomacher)
   6.2 Sac stomacher à filtre
   6.3 Bain d'eau à agitation
   6.4 Dispositif de filtration
   6.5 Membranes filtrantes
   6.6 Étuve réglable à 37 degrés C +/- 1 degrés C
7 Échantillonnage
8 Préparation de l'échantillon pour essai
9 Mode opératoire
   9.1 Préparation de la suspension mère
   9.2 Traitement de la suspension mère
   9.3 Filtration et dépot des membranes filtrantes
   9.4 Incubation
   9.5 Dénombrement et isolement des colonies caractéristiques
   9.6 Confirmation de l'espèce Listeria monocytogenes
10 Expression des résultats
   10.1 Calcul du nombre de L. monocytogenes
        (avec halo) présumées par membrane (Ch)
   10.2 Calcul du nombre total de Listeria monocytogenes
        présumées (avec halo) issues des 3 membranes (Cht)
   10.3 Calcul du nombre total de Listeria monocytogenes
        confirmées (C)
   10.4 Calcul du nombre de Listeria monocytogenes par
        g/produit
11 Fidélité
12 Rapport d'essai
Annexe A (normative) Représentation schématique du
         mode opératoire
Annexe B (informative) Schéma du dispositif de filtration
Annexe C (informative) Exemple de calculs
Annexe D (informative) Résultats des essais interlaboratoires
Bibliographie

Le présent document spécifie une méthode pour le dénombrement des Listeria monocytogenes dans le saumon fumé et la truite fumée. La méthode s'applique pour des taux de contamination compris entre 0,2 ufc/g et 200 ufc/g. Lors de l'analyse d'échantillons dont les niveaux de contamination ne sont pas a priori connus, il est nécessaire de réaliser en parallèle un dénombrement selon le principe de la méthode NF EN ISO 11290-2.